更新更新時間:2021-11-27
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液相色譜流動相使用注意
上海連橋生物科技有限公司
流動相溶劑的選擇
1.所選用的流動相溶劑要有一定的化學穩(wěn)定性,不與固定相和樣品組分起反應,其純度和化學特性必須滿足色譜過程的穩(wěn)定性和重復性的要求 2.溶劑應當不干擾檢測器的工作 3.在制備分離中, 溶劑應當易于除去, 不干擾對分離組分的回收。 4.溶劑的粘度要小 5.從實用角度考慮 二 1.流動相溶劑應選擇HPLC的溶劑或依此為標準的溶劑。流動相使用前用0.45μm濾膜過濾、脫氣,清除微粒和灰塵。在送液泵內(nèi),為了防止雜物(固體)進入流路,裝有吸濾器,但網(wǎng)孔徑為10μm,比此更小的顆粒仍然可通過,這會導致流路和柱子堵塞和污染。為此,建議常用0.45μm濾膜過濾。流動相溶劑須經(jīng)脫氣,如不脫氣,在溶劑混合時,或壓力溫度變化時容易產(chǎn)生大量氣泡,會導致泵誤動作和輸液不暢,檢測器產(chǎn)生噪聲信號等。 2.流動相恢復到室溫后使用。流動相溫度與室溫相差時 3.做HPLC流動相的試劑應用HPLC級的 4.流動相的pH值過高或過低 5.用緩沖鹽做流動相時,在使用前和使用后都要用水清洗流路 6.若需要使用含鹽的流動相,使用前請務必guo濾 7.進行梯度實驗時要注意梯度變化過程中流動相的互溶性 8.在更換兩種互不相溶的流動相時,中間要用異丙醇溶液清洗過渡 9.儀器在短期(兩三天)不用時,流路中可以是甲醇或水。儀器在長期不用時 10.對于UV等檢測器用于高靈敏度檢測時 11.當流動相溶劑為乙腈時 12.流動相含有濃硫酸 13.用于檢定梯度等性能時 14.注意:稀硝酸與甲醇不能混合,否則有可能會引起爆炸。 本篇轉(zhuǎn)載至實驗之家