液相流動相稀釋劑的選擇
更新更新時間：2021-08-09
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液相流動相稀釋劑的選擇
上海連橋生物科技有限公司
稀釋劑的選擇
分析方法開發(fā) 1 選擇稀釋劑，首先應(yīng)考慮采用流動相體系 稀釋劑不得干擾已知雜質(zhì)及主峰的檢測 根據(jù)化合物的溶解特定，可適當加入助溶劑 允許對照品溶液與供試品溶液配制方式有差異 2 通常有關(guān)物質(zhì)方法中主成分的濃度較大（1mg/ml~10mg/ml） 供試品提取不充分 供試品提取重現(xiàn)性差 樣品在檢測過程中有析出，存在影響雜質(zhì)準確定量的風險 因此在進行方法摸索時 3 基于雜質(zhì)譜分析，配制混標 部分雜質(zhì)峰面積明顯降低，可根據(jù)該類型化合物的結(jié)構(gòu)特點 部分雜質(zhì)峰面積明顯升高，結(jié)合主成分的結(jié)構(gòu)特點，調(diào)整稀釋劑的組成或注明供試品溶液的保存條件（如避光、冷藏等）。 “臨用新制"，應(yīng)注明時間，確保測定數(shù)據(jù)的準確性。若穩(wěn)定性小于方法運行時間，個人認為是不可接受的。 4、關(guān)注溶劑效應(yīng) 溶劑效應(yīng)原定義為溶劑對于反應(yīng)速率、平衡甚至反應(yīng)機理的影響。針對于分析方法，主要指的是對溶解平衡的影響，涉及稀釋劑與流動相、流動相與固定相。 4.1、稀釋劑選擇不當引起的溶劑效應(yīng)-現(xiàn)象及原理 樣品溶液的溶劑強度強于流動相溶劑強度時可能會造成的峰展寬、峰分叉現(xiàn)象，其過程為當溶解樣品的溶劑不同于流動相時，樣品溶劑與流動相發(fā)生混合 4.2 通過HPLC儀器比對一下兩個劈叉峰的紫外吸收波譜 4.3、稀釋劑選擇不當引起的溶劑效應(yīng)-如何避免降低稀釋的強度（如增加水相比例、調(diào)整pH等）或更換稀釋劑為流動相，2、在保證檢測靈敏度的前提下，降低進樣量。3、增加峰形前延抑制器，峰形前延抑制器的設(shè)計原理是，在色譜柱前端引入一個大小合適的空腔，使樣品到達色譜前被存留于空腔內(nèi)的流動相（色譜柱平衡時流動相會充滿空腔）稀釋，使“樣品溶劑"經(jīng)稀釋后更接近流動相的組成，實現(xiàn)“樣品溶劑與流動相的組成接近"，并取代“用流動相溶解樣品"的解決方案。 4.4、基質(zhì)效應(yīng)（溶劑效應(yīng)的一個變種） 基質(zhì)效應(yīng)是指檢測系統(tǒng)檢測樣品中的分析物時，處于分析物周圍的所有非分析物質(zhì)對分析物測定的影響。產(chǎn)生基質(zhì)效應(yīng)的原因與以下四個因素有關(guān)：儀器的設(shè)計、試劑的組成成分、測試方法的原理、質(zhì)控材料的組成及處理技術(shù)等，通過回收率可以評估分析方法是否受基質(zhì)效應(yīng)的影響，一般若回收率普遍偏低、偏高或波動較大，建議考慮基質(zhì)效應(yīng)的影響。 本篇轉(zhuǎn)至實驗之家
