,特別是反相色譜中,不應直接從有機溶劑改變?yōu)槿渴撬?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">,反之亦然
。如使用柱溫控制裝置時,應注意在通人流動相后才能升溫
。一般說來反相液相色譜柱不能反沖
,只有生產者指明該柱可以反沖時,才可以反沖除去留在柱頭的雜質
。否則反沖會迅速降低柱效
。選擇使用適宜的流動相,以避免固定相被破壞
。有時可以在進樣器前面連接一個預柱
,分析柱是鍵合硅膠時,預柱為硅膠
,可使流動相在進入分析柱之前預先被硅膠“飽和”
,避免分析柱中的硅膠基質被溶解。避免將基質復雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內
,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和
色譜柱之間連接一個保護柱
。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換
。
經常用強溶劑沖洗色譜柱
,清除保留在柱內的雜質
。在進行清洗時,對流路系統(tǒng)中流動相的置換應以相混溶的溶劑逐漸過渡
,每種流動相的體積應是柱體積的20倍左右
,即常規(guī)分析需要50-75mL。保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇
,柱接頭要擰緊
,防止溶劑揮發(fā)干燥。禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間
。反相液相色譜柱使用過程中
,如果壓力升高,一種可能是燒結濾片被堵塞
,這時應更換濾片或將其取出進行清洗
;另一種可能是大分子進人柱內,使柱頭被污染
;如果柱效降低或色譜峰變形
,則可能柱頭出現塌陷,死體積增大
。安捷倫
色譜柱在完成分離分析工作之后
,不應立即停機,需及時對色譜分析系統(tǒng)進行沖洗
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