生物發(fā)光技術(shù)
更新更新時(shí)間：2021-08-09
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生物發(fā)光技術(shù)
上海連橋生物科技有限公司
原理
生物發(fā)光是生物體內(nèi)一種特定酶催化，將生物化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能的化學(xué)發(fā)光現(xiàn)象
。生物發(fā)光技術(shù)通過將熒光酶基因整合到預(yù)期觀察的細(xì)胞染色體DNA中以表達(dá)熒光素酶，然后培養(yǎng)出能穩(wěn)定表達(dá)熒光素酶的細(xì)胞株。將標(biāo)記好的細(xì)胞接種到實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)后，當(dāng)外源（腹腔或靜脈注射）給予其第五熒光素（luciferin），在生物體內(nèi)環(huán)境中三磷酸腺苷（ATP）、O2及Mg2+存在的條件下，熒光素酶催化底物熒光素發(fā)生氧化脫羧反應(yīng)，釋放可見光能，從而實(shí)現(xiàn)生物發(fā)光（偏紅色），通過電荷耦合器件（CCD）設(shè)備等生物光學(xué)成像系統(tǒng)進(jìn)行檢測，即生物發(fā)光活體成像技術(shù)（BLI）?div id="d48novz" class="flower left">這種無需激發(fā)就可發(fā)出的生物熒光
，組織穿透能力強(qiáng)，靈敏度高，由于沒有激發(fā)光的非特應(yīng)性干擾，信躁比較高。
應(yīng)用
生物發(fā)光技術(shù)因具有*的靈敏度
，便于對(duì)疾病動(dòng)物模型微小病灶進(jìn)行檢測，而且不涉及反射性有害物質(zhì)
，安全系數(shù)高
，實(shí)驗(yàn)結(jié)果直觀，可精確定量
，重現(xiàn)性好
，操作簡單，得到迅速發(fā)展
。目前該技術(shù)已應(yīng)用于醫(yī)療衛(wèi)生
、食品、環(huán)境等領(lǐng)域
，尤其在抗腫瘤領(lǐng)域應(yīng)用極為廣泛
，實(shí)現(xiàn)了在活體內(nèi)實(shí)時(shí)、連續(xù)地對(duì)腫瘤細(xì)胞生長
、浸潤
、轉(zhuǎn)移等惡性生物學(xué)行為的檢測，也可進(jìn)行藥物選擇及個(gè)體化治療
。
由于熒光素酶的活性和穩(wěn)定性受很多因素影響，如緩沖液種類
、溫度
、PH、金屬離子、酶濃度及發(fā)光測定時(shí)間等，尤其PH對(duì)其影響對(duì)大，在使用中需要加以注意。
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