安捷倫色譜柱的使用和維護(hù)
更新更新時間：2019-04-18
瀏覽次數(shù)：3624
安捷倫色譜柱是基于溶質(zhì)、極性流動相和非極性固定相表面間的疏水效應(yīng)建立的一種色譜模式，任何一種有機(jī)分子的結(jié)構(gòu)中都有非極性的疏水部分
，這部分越大
，一般保留值越高
，在液相色譜中這是應(yīng)用面較廣的一種分離模式
，在生物大分子的反相液相色譜條件下
，流動相多采用酸性的
、低離子強(qiáng)度的水溶液，并加一定比例的能與水互溶的異丙醇
、乙腈或甲醇等有機(jī)改性劑
，大量使用的填料為孔徑在30納米以上的硅膠烷基鍵合相，除此之外
，也有少量高聚物微球
。
安捷倫色譜柱的使用和維護(hù)
在日常分離分析工作中，反相液相色譜柱的正確使用和維護(hù)十分重要
，色譜柱使用是否得當(dāng)
，直接影響色譜柱的壽命，稍有不慎就會降低柱效
、縮短使用壽命甚至損壞
。在色譜操作過程中，需要注意下列問題
，以維護(hù)色譜柱。
?div id="jfovm50" class="index-wrap">。?）柱子在裝卸
、更換時，動作要輕
，接頭擰緊要適度
。必須防止較強(qiáng)的機(jī)械振動，以免柱床產(chǎn)生空隙
。
?div id="m50uktp" class="box-center"> 。?）如果儀器用來做常規(guī)分析，樣品種類有限
，但分析次數(shù)多
，則不妨為每一類常規(guī)分析配置一根柱，這樣有助于延長柱子的壽命
。
?div id="m50uktp" class="box-center"> 。?）避免壓力和溫度的急劇變化及任何機(jī)械震動
。溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內(nèi)的填充狀況；柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內(nèi)填料
，因此在調(diào)節(jié)流速時應(yīng)該緩慢進(jìn)行
，在閥進(jìn)樣時閥的轉(zhuǎn)動不能過緩。
?div id="m50uktp" class="box-center"> 。?）應(yīng)逐漸改變?nèi)軇┑慕M成
，特別是反相色譜中，不應(yīng)直接從有機(jī)溶劑改變?yōu)槿渴撬?div id="m50uktp" class="box-center"> ，反之亦然?/div>
?div id="m50uktp" class="box-center"> 。?）如使用柱溫控制裝置時，應(yīng)注意在通人流動相后才能升溫
。
?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">。?）一般說來反相液相色譜柱不能反沖，只有生產(chǎn)者指明該柱可以反沖時
，才可以反沖除去留在柱頭的雜質(zhì)
。否則反沖會迅速降低柱效。
?div id="jpandex" class="focus-wrap mb20 cf">。?）選擇使用適宜的流動相
，以避免固定相被破壞。有時可以在進(jìn)樣器前面連接一個預(yù)柱
，分析柱是鍵合硅膠時
，預(yù)柱為硅膠，可使流動相在進(jìn)入分析柱之前預(yù)先被硅膠“飽和”
，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解
。
8）避免將基質(zhì)復(fù)雜的樣品尤其是生物樣品直接注人柱內(nèi)，需要對樣品進(jìn)行預(yù)處理或者在進(jìn)樣器和色譜柱之間連接一個保護(hù)柱
。保護(hù)柱一般是填有相似固定相的短柱
。保護(hù)柱可以而且應(yīng)該經(jīng)常更換。
?div id="4qifd00" class="flower right">
。?）經(jīng)常用強(qiáng)溶劑沖洗色譜柱，清除保留在柱內(nèi)的雜質(zhì)。在進(jìn)行清洗時，對流路系統(tǒng)中流動相的置換應(yīng)以相混溶的溶劑逐漸過渡，每種流動相的體積應(yīng)是柱體積的20倍左右，即常規(guī)分析需要50-75mL。 ?div id="4qifd00" class="flower right">
。?0）保存色譜柱時應(yīng)將柱內(nèi)充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發(fā)干燥 。禁止將緩沖溶液留在柱內(nèi)靜置過夜或更長時間
。
（11）反相液相色譜柱使用過程中
，如果壓力升高
，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗
；另一種可能是大分子進(jìn)人柱內(nèi)
，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形
，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷
，死體積增大。
?div id="m50uktp" class="box-center"> 。?2）安捷倫色譜柱在完成分離分析工作之后
，不應(yīng)立即停機(jī)，需及時對色譜分析系統(tǒng)進(jìn)行沖洗
，一般0.5h以上
，以除去色譜柱內(nèi)的雜質(zhì)。
